Robusstart Taq DNA Polymerase
Robustar Taq DNA Polymerase initium calidum DNA polymerase est.Productum hoc non solum melius inhibere potest reactionem non specialem causatam per non-specificam sublationem primorum seu primarum aggregationis in processu pcr systematis praeparationis et amplificationis.Ideo excellentem proprietatem habet et efficacior est ad amplificationem intentionum humilium intentionum, et ad multiplicationem per amplificationem reactionem aptam est.Hoc autem opus valde bonum habet applicabilitatem, et amplificatio stabilis proventuum in diversis speciebus per reactiones obtineri potest.
Components
1.5 U/μL Robusstart Taq DNA polymerase
2.10 PCR Buffer II (Mg² + liberum) (libitum)
3.25 mM MgCl2(optional) back
* 10 PCR Buffer II (Mg²+ gratis) non continet dNTP et Mg²+, adde dNTPs et MgCl2cum parat reactionem ratio.
Commendatur Applications
1.Fast ampliatio.
2.Multiplex amplificatio.
3.Dirige amplificationem sanguinis, obiectis, et alia exempla.
4.Morborum respiratorii detectio.
Repono Condition
-20°C per longum tempus repositionis, ante usum bene misceri debet, evitandae frequentes gelatae.
* Si praecipitatio post refrigerationem contingit, normale est;Commendatur aequilibrare ut locus temperatus ante mixtionem et usum.
Unitas Definition
Una unitas activa (U) definitur quantitate enzyme quae 10 nmol deoxyribonucleotide incorporandi in materia acido-insolabili ad 74°C per 30 min utens reducitur salmo sperma DNA ut template/primer.
Regimen quālitātis
1.SDS-PAGE puritas electrophoreticae major quam 98%.
2.Sensus amplificatio, praepostere ut- batch imperium, stabilitas.
3.Nulla actio nucleas exogenosa, nulla endonucleasis exogenous vel contagione exonuclease
Instructiones
Reactionem Setup
| Components | Magnitudo (μL) | Finalis intentioni |
| X PCR Buffer II (Mg² + gratis)a | 5 | 1× |
| dNTPs (10mM quisque dNTP) | 1 | 200 μM |
| 25 mM MgCl2 | 2-8 | 1-4 mM |
| Robusstart Taq DNA Polymerase (5U/μL) | 0.25-0.5 | 1.25-2.5 U |
| 25 Primer mixb | 2 | 1× |
| Formula | - | 1 μg/reactionem |
| ddH2O | Ad 50 | - |
Notae:
1) a.Quiddam dNTP et Mg²+ non continet, adde dNTPs et MgCl .2cum parat reactionem ratio.
2) b.Si usus est pro qPCR/qRT-PCR, explorationes fluorescentes ad systema reactionem adici debent.Solet finalis intentio prima 0.2 μM fructus bonos dabit;si pauper effectus reactionem est, prima intentio accommodari potest in ambitu 0.2-1 μM.Specillum intentio plerumque optimized est in amplitudine 0.1-0.3 μM.Concentratio graduum experimentorum perfici potest ut optimam primitivae compositionem et explorationem invenias.
Scelerisque revolutio protocol
| Iusto PCRprocessus | |||
| Gradus | Temperature | Tempus | Cycles |
| Pre-denaturation | 95℃ | 1-5 mins | 1 |
| Denaturation | 95℃ | 10-20 sec | 40-50 |
| Annealing / Extensio | 56-64℃ | 20-60 sec | |
| Fast PCRprocessus | |||
| Gradus | Temperature | Tempus | Cycles |
| Pre-denaturation | 95℃ | 30 sec | 1 |
| Denaturation | 95℃ | 1-5 sec | 40-45 |
| Annealing / Extensio | 56-64℃ | 5-20 sec | |
Notae
1.Ampliatio rate celeritatis DNA polymerasis non minor quam 1 kb/10 s debet esse.Temperatus oriuntur et cadunt rate, temperatura imperium modus et calor conduction efficientia diversorum PCR instrumentorum valde variant, ideo commendatur ad optimize optimae reactionis condiciones pro speciei ieiunii PCR instrumenti.
2.Ratio est valde accommodata, cum subtilitate et sensibilitate superiore.
3.Apta usui tamquam summa sensibilitas PC reagentis detectionis, et adhiberi potest in multiplex PCR motus amplificationis causa.
4.5′ → 3′ actio polymerasis, 5′ → 3′ actio exonuclease;non 3′ → 5′ exonuclease actio;nullum munus proofreading.
5.Apta probatio qualitativa et quantitativa ipsius PCR et RT-PCR.
6.Finis 3 producti PCR est A, qui in T vector directe iungi potest.
7.Modus tres gradus primariis commendatur in furnum temperaturis humilibus vel ad amplificationem fragmentorum ultra 200 bp.
