DNase I
DNase I (Deoxyribonuclease I) est endodeoxyribonuclease quae concoquere potest vel singulariter subductis DNA.Vincula phosphodiestri agnoscit et inhaeret ut monodeoxynucleotides vel simplices vel oligodeoxynucleotides duplices destitutae cum coetibus phosphatis in 5′ terminalibus et hydroxylis in 3′-terminalibus efficiant.Actio DNase I a Ca2+ dependet et a metallo divalente moveri potest ut Mn2+ et Zn2+.5mM Ca2+ enzymum ab hydrolysi tuetur.Coram Mg2+, enzyme passim cognoscere et inhaerere aliquem locum in quovis filo DNA.Coram Mn2+, fila duplicia DNA eodem fere situ cognosci et adglutinari possunt, ut finem DNA fragmentorum plani formarent vel fragmenta DNA glutinosa cum 1-2 fragmentis nucleotidis prominentibus.
Product Property
Bovinus Pancreas DNase I expressus in fermento systematis expressi et purificatus est.
Componentes
Component | Magnitudo | |||
0.1KU | 1KU | 5KU | 50KU | |
DNase I, RNase-free | 20μL | 200μL | 1mL | 10mL |
10Dnase ego Buffer | 1mL | 1mL | 5× 1mL | 5× 10mL |
Transportatio et at
1. Repono Stabilitas: - 15℃~-25℃ pro repono;
2.Transport Stability: Transport sub glaciem sarcinas;
Supplevit in: 10 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl .2,% glycerolum, pH 7.6 ad 25℃.
Unitas Definition
Una unitas definitur quantitati enzyme quae 1 µg pBR322 DNA in 10 minuta ad 37°C omnino deprimet.
Regimen quālitātis
RNAse:5U ex DNase I cum 1.6 μg MS2 RNA per 4 horas ad 37 nullam degradationem cedit sicut agarose gel electronicae determinatae.
Bacterial Endotoxin:LAL-test, secundum pharmacopoeam Sinensem IV 2020 editum, modum testium gel limitis, regulae generalis (1143).Contentum bacterial endotoxinum ≤10 EU/mg debet esse.
Instructiones ad usus
1. Praeparate solutionem reactionis in tubo RNase-libero secundum proportiones infra numeratas:
Component | Magnitudo |
RNA | X μg |
10 DNase I Buffer | 1 μL |
DNase I, RNase-free(5U/μL) | 1 U per μg RNA |
ddH2O | Usque ad 10 μL |
2.37 ob 15 minuta;
3. Adde terminationem quiddam obsistere reactionem, et calor 65℃ per 10 minuta ad inactivate DNase I. Exemplar directe adhiberi potest ad experimentum sequentis transcriptionis.
Notae
1.Utor 1U DNase I per μg RNA, vel 1U DNase I minus quam 1μg RNA.
2.EDTA addenda est ad intentionem finalem 5 mM ad tuendam RNA ne degradetur in enzyme inactivatione.