Ferum Taq DNA Polymerase
Taq DNA Polymerasis est DNA polymerasis thermostica e Thermo aquatico YT-1, quae polymerasium 5′ →3′ activitatem 5´ moto endonuclease possidet.
Components
| Component | HC1010A-01 | HC1010A-02 | HC1010A-03 | HC1010A-04 |
| 10× Taq Buffer | 2×1 mL | 2×10 mL | 2×50 mL | 5×200 mL |
| Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 0.1 mL | 1 mL | 5 mL | 5×10 mL |
Repono Condition
Transportatio sub 0°C et reponenda -25°C~-15°C.
Unitas Definition
Una unitas definitur quantum enzyme, quod 15 nmol de dNTP in acidi insolubili materia in 30 minuta ad 75°C incorporate definitur.
Regimen quālitātis
1.Dapibus Puritas Asssay (SDS-PAGE):Puritas Taq DNA polymerasis ≥95% ab analysi SDS-Paginae constituta fuit.
2.Endonuclease Actio:Minimum 5 U Taq DNA polymerasis cum 1 μg λDNA pro 16 horis ante 37 eventum in nullo detectabili degradationis modo determinato.
3.Exonuclease Actio:Minimum 5 U Taq DNA polymerasis cum 1 μg λ -Hind digestum DNA pro 16 horis ante 37 eventum in nullo detectabili degradationis modo determinato.
4.Nickase Activity:Minimum 5 U Taq DNA polymerasis cum 1 μg pBR322 DNA pro 16 horis ante 37°C eventum in nullo detectabili degradationis modo determinato.
5.RNase Actio:Minimum 5 U Taq DNA polymerasis cum 1.6 μg MS2 RNA pro 16 horis ante 37°C eventum in nullo detectabili degradationis modo determinatum.
6.E. coliDNA:5 U Taq DNA polymerase obiectu ad praesentiam E. coli genomic DNA utens TaqMan qPCR cum primers specificis pro E. coli 16S rRNA locum.The E. coli genomic DNA contagione ≤1 Exemplar est.
7.PCR Amplificatio (5.0 kb Labda DNA)- A 50 µL reactionem continens Labda DNA 5 ng cum 5 unitatibus Taq DNA Polymerase viginti cyclos PCR amplificationis proventus in producto exspectato 5.0 kb.
Reactionem Setup
| Components | Magnitudo |
| Formula DNAa | ad libitum |
| 10 μM Primus | 1 μL |
| 10 μM Reverse Primer | 1 μL |
| dNTP Mix (10mM each) | 1 μL |
| 10×Taq Buffer | 5 μL |
| Taq DNA Polymeraseb | 0.25 μL |
| Nucleas-liber aqua | Usque ad 50 μL |
Notae:
1) Optima reactionem concentratio diversorum exemplorum diversa est.Sequens tabula ostendit usum templates commendatum 50 µL systematis reactionis.
| DNA | Moles |
| Genomic | 1 ng-1 μg |
| Plasmid vel Virales | 1 pg-1 ng |
2) Optima intentio Taq DNA Polymerase ab 0.25 µL~1 µL in applicationibus specialibus discurrere potest.
ReactionemProgram
| Gradus | Temperature(°C) | Tempus | Cycles |
| Coepi denaturationa | 95 | 5mins | - |
| Denaturation | 95 | 15-30 s | 30-35 Cycli |
| Annealingb | 60 | 15 s | |
| Extensio | LXXII | 1kb/min | |
| Extensio finalis | LXXII | 5mins | - |
Notae:
1) Conditio initialis denaturation ad maiorem amplificationem reactiones apta est et secundum multiplicitatem structurae templates mutari potest.Si structura templates implicata est, prae-denaturationis tempus extendi potest ad 5 – 10 min ut meliorem denaturationis initialem effectum.
2) Temperatura furnum aptari debet secundum valorem primi primi, qui plerumque ad 3~5/ inferiorem quam Tm valoris primi;Pro complexis exemplaribus, necesse est temperatura furnum accommodare et extensionem temporis extendere ad amplificationem efficientem consequendam.
