Temperatura Sensitiva UNG
Temperatura sensitiva UNG (TS-UNG) obtinetur a recombinante expressione in E. coll.Enzyme catalyses liberae uracilii liberae ab uracili continente simplici et subductis DNA et contra RNA quietat.Comparatus cum conventionali UNG enzyme E. coli gene originis, TS-UNG enzyme altiorem actionem habet ad temperaturas humilis (20℃~37℃) et est temperatura sensitiva et facile inactivated (50℃), degradationem dUTP continentis amplificationis vitando. producta ad locus temperatura per residua actione quae post inactivationem conventionalis UNG enzyme remaneat.Ergo TS-UNG enzyme non solum convenit ad contaminationem PCR praeventionis reactionis, sed etiam bene congruit progressioni RT-PCR amplificationis et adhiberi potest in RT-PCR contagione praeventionis reactionis.
Commendatur Application
Contaminatio praeventionis amplificatio
Repono Condition
-20°C per longum tempus repositionis, ante usum bene misceri debet, evitandae frequentes gelatae.
Repono quiddam
20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, Stabilizer, 50 Glycerol.
Unitas Definition
Moles enzyme ad 1µg detrudere debebant DNA simplicium subductis, quae dU bases in hora 1 37°C sunt, unitas actionis 1 (U).
Regimen quālitātis
1.SDS-Paginae electrophoreticae puritatis major XCVIII%
2.Degradatio actio, batch-ad-batch imperium, stabilitas
3.Nulla actio nucleasis exogenosa, nulla endonucleasis exogenosa vel contagione exonucleasis.
Instructiones
| Components | Volumen (μL) | Finalis concentration |
| X PCR Buffer (dNTP gratis, Mg²+Liber) | 5 | 1× |
| dUTPs (dCTP, dGTP, dATP) | - | 200 μM |
| dUTP (reponere dTTP) | - | 200-600 μM |
| 25 mM MgCl2 | 2-8 μL | 1-4 mM |
| 5 U/μL Taq | 0.25 | 1.25 U |
| 1 U/μLTS-UNG | 0.5 (0.1-0.5) | 0.5 U (0.1-0.5U) |
| 25 Primario Mixa | 2 | 1× |
| Formula | - | ＜1μg/reactionem |
| ddH₂O | Ad 50 | - |
Nota: a: Si usus pro qPCR/qRT-PCR, specillum fluorescentium in systematis reactionem addi debet.Solet finalis intentio prima 0.2 μM fructus bonos dare potest;Cum pauper effectus reactionem est, prima intentio accommodari potest in ambitu 0.2-1 μM.Plerumque, specillum retrahitur optimized est in amplitudine 0.1-0.3 μM.Concentratio graduum experimentorum perfici potest ut optimam primitivae compositionem et explorationem invenias.
Notae
1.Optima reactionem temperatura TS-UNG enzyme relative humilis est, et optimized in latitudine 20℃~37℃, dosis enzyme et reactionis tempus optimized in latitudine 0.1~0.5 U, 5~ 10 min;et enzyme in processu transpositionis transpositione inefficax potest.
2.PCR et RT-PR non convenit contagione.
3.Fugientes crebris gelidis, et magnis ambigua temperatura ne exponas.
4.Diversa generum ampliandarum diversae utendi efficientiam dUTP et sensibilitatem ad UNG enzyme habent, ergo, si usus systematis UNG minui in deprehensione sensitivum ducit, ratio reactionis aptari debet et optimized, si subsidio technico opus est, pete contactum. societas nostra.
