Universal SYBR GREEN qPCR Premix (Blue)
Cat No: HCB5041B
Universalis Blue qPCR Magister Mix (Dye Based) prae-solutio est quantitatis PCR 2× temporis amplificationis, quae summa sentiendi et speciei est propria, colore caeruleo est, et effectus exempli additionis typum habet.Core componente Taq DNA polymerasis anticorpi calidi initium utitur ad amplificationem specialem non-specialis efficaciter inhibere ob praeparationem primi furnum in sample.Eodem tempore formula promo- tiva addit ad amplificationem efficientiam PCR reactionis augendam et amplificationem genesis cum diversis contentis GC coaequandis (30~70%), ut quantitatis PCR bonam relationem linearem consequi possit in lato quantitatis. tellus.Productum hoc ROX passivum Reference Dye specialem continet, quod pluribus instrumentis qPCR competit.Non necesse est diversis instrumentis intentionem ROX accommodare.Solum necessarium est primarios et exempla addere ut reactionem systema amplificandi praeparet.
Components
Universal Blue qPCR Master Mix
Repono conditionibus
Productum cum glacierum sarcinis uit et condi potest ad -25℃~-15℃ per XVIII menses.Necessarium est lucem validam irradiationem vitare cum systematis reactionem recondere vel praeparare.
Specification
Coniunctis | 2× |
Deprehensio modum | SYBR |
PCR methodo | qPCR |
Polymerase | Taq DNA polymerase |
Genus specimen | DNA |
Applicationem armorum | Maxime instrumenta qPCR |
Genus productum | SYBR premix pro real-time fluorescens quantitatis PCR |
Applicare ad (applicationem) | Gene Expressio |
Instructiones
1.Reaction Ratio
Components | Volome(μL) | Volome(μL) | Finalis intentioni |
Universal SYBR GREEN qPCR Premix | 25 | 10 | 1× |
Deinceps de primario (10μmol/L) | 1 | 0.4 | 0.2μmol/L |
Reverse Primus (10μmol/L) | 1 | 0.4 | 0.2μmol/L |
DNA | X | X | |
ddH2O | ad L " | usque ad XX " | - |
Permisce ante usum ad vitandum nimias bullas ex concussione vehementi.
a) Concentratio prima: Contentio primarius finalis est 0.2μmol/L, et etiam accommodari potest inter 0.1 et 1.0μmol/L pro opportunitate.
b) Formula retrahitur: Si templates solutionis meri cDNA stirpis est, volumen usus non debet 1/10 totius voluminis qPCR reactionis excedere.
c) Formula dilutionis: Commendatur solutionem cDNA stirpis per 5-10 tempora diluere.Optima Formulae additae copia melior est, cum CT valorem amplificationis consecutus est cyclos 20-30.
d) Reactionis systema: Commendatur uti 20μL vel 50μL ut efficaciam et iterabilem scopum gene amplificandi curet.
e) Praeparatio systematis: Quaeso, quaeso, para in scamno supereminente mundo et utere apicibus et fistulae reactionis sine residuo nucleasi;labris colum cartridges uti commendatur.Fuge crux contagione et aerosol contagione.
2.Progressio reactionem
Latin Programma
cyclus gradus | Temp. | Tempus | Cycles |
Coepi denaturation | 95℃ | 2 min | 1 |
Denaturation | 95℃ | 10 sec | 40 |
Annealing / Extensio | 60℃ | 30 sec | |
Scaena curva liquescens | Instrumentum Defalte | 1 |
Velox Program
cyclus gradus | Temp. | Tempus | Cycles |
Coepi denaturation | 95℃ | 30 sec | 1 |
Denaturation | 95℃ | 3 sec | 40 |
Annealing / Extensio | 60℃ | 20 sec | |
Scaena curva liquescens | Instrumentum Defalte | 1 |
Ieiunium programma quamplurima generum aptum est , et normae normae pro singulis generum structurae complexae secundariae probandae sunt .
a) Annealing temperatura et tempus: Quaeso compone secundum longitudinem primitivae et scopo gene.
b) Fluorescens signum acquisitionis (★): pone modum procedendi experimentalem secundum requisita in instructionibus ad usum instrumenti.
c) Curva liquescens: Instrumentum programma default regulariter adhiberi potest.
3. Ex Analysis
Minimum trium biologicorum replicationum pro quantitatis experimentis requirebatur.Post reactionem, amplificatio curvae et curvae liquescens confirmari debet.
3.1 amplificatio curvae:
Vexillum amplificationis curvae S informibus est.Analysis quantitatis accuratissima est quando Ct valorem cadit inter 20 et 30. Si Ct valor minor est quam 10, necesse est Formulam diluere et iterum experiri exsequi.Cum valorem Ct inter 30-35 intercedit, necesse est exemplum intentionis vel systematis reactionis augere, ut efficientiam amplificationis augeat et accurate analysin resultat.Cum valor Ct 35 maior est quam 35, eventus test non potest expressionem gene quantita- tive resolvere, sed adhiberi potest pro analysi qualitativa.
3.2 curva liquatio;
Unius apicem curvae liquescens indicat reactionem specificitatem bonam et analysim quantitatis perfici posse;si curva liquatio duplices vel multiplices apices ostendit, analysis quantitatis fieri non potest.Curva liquescens duplices apices ostendit, et diiudicare necesse est utrum cacumina non-scoporum prima dimer vel non specifica amplificatio per DNA agarose gel electrophoresis sit.Si primarius dimer est, commendatur reducere primarium intentionem vel primarios redesignandi cum efficientia amplificationis altae.Si amplificatio non specificata est, temperatura furnum auget, vel primarios cum specificitate resignet.
Notae
Quaeso uti necessariam PPE, talem tunicam et chirothecam labrum, ut tuam salutem et salutem curet.
Hoc productum est ad investigationis solum