DNase I (Rnase Free) (5u / ul)
Cat No: HC4007A
DNase I (Deoxyribonuclease I) est endodeoxyribonuclease quae concoquere potest vel singulariter subductis DNA.Vincula phosphodiestris agnoscit et inhaeret ut monodeoxynucleotides vel simplices vel oligodeoxynucleotides duplices destitutae cum coetibus phosphatis ad 5'-terminalem et hydroxylam in 3'-terminalibus efficiant.Actio DNase I pendent in Ca2+et potest moveri per divalent metallum iones ut Mn2+et Zn*2+.5 mM Ca2+enzyme ab hydrolysi tuetur.Coram Mg*2+enzyme locum quemvis in filo DNA passim agnoscere et inhaerere potuit.Coram Mn2+, duplices fila DNA eodem tempore cognosci et adhaerere possunt in eodem fere situ ad DNA fragmenta plana finem formare vel DNA fragmenta cum 1-2 nucleotide prominente glutinosa.
Components
Nomen | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
DNase I, RNase-free | 20μL | 200μL | 1mL | 10 mL |
10Dnase ego Buffer | 1mL | 1mL | 5 1mL | 5 ×10 mL |
Repono conditionibus
-25℃~-15℃ pro repono;Onerarias sub glaciem sarcinas.
Instructiones
1. Solutio in RNase libero tubi reactionem praepara secundum proportiones infra numeratas:
Component | Magnitudo |
RNA | X µg |
10 DNase I Buffer | 1μL |
DNase I, RNase-free(5U/μL) | 1 U per µg RNA① |
ddH2O | Usque ad 10μL |
Nota: ① Computa codicem DNase I quod addendum est secundum quantitatem RNA.
2. 37 per 15 minuta;
3. Add 0.5M EDTA ad ultimam intentionem 2.5mM~5mM, et calor 65℃ per 10 minutas ad obtrectationem motus.Specimen directe adhiberi potest ut altera reactionem transcribendaexperimentum.
Unitas Definition
Unitas una definitur quantum enzyme quod 1µg pBR322 completely penitus deprimetDNA in 10 minutes at 37℃.
Regimen quālitātis
RNAse:5U ex DNase I cum 1.6µg MS2 RNA per 4 horas ad 37℃ nullum cedit sicut degradatio.agarose gel electrophoresis determinatur.
Notae
1. Quaeso a te ipso para 0.5MEDTA.
2. Utere 1U DNase I per μg RNA.Attamen si RNA minor quam 1µg est, quaeso utere 1U DNase I.
3. Pone enzyme in glaciem in operatione.