Rnase Inhibitor (Glycerolum gratis)
Inhibitor Murine RNase est recombinans Murinum RNAse inhibitor expressum et purificatum ab E.coli.Ligat ad RNase A, B vel C in 1, ratione per compagem non covalentem, inhibens actionem trium enzymorum et RNA ab degradatione defendens.Attamen contra RNAse 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H vel RNAse ab Aspergillo non valet.Murine RNase inhibitor ab RT-PCR, RT-qPCR et IVT mRNA probatus est, et compatible cum variis transcriptases commerciales inversas, DNA polymerases et RNA polymerases.
RNase inhibitoribus humanis comparatus, inhibitor RNase murinus duas cysteinas non continet quae oxidationis valde sensibilis sunt quae inhibitoris inactivationem causant.Quod efficiens illud stabilimentum ad concentrationes DTT humilis (minus quam 1 mM).Haec factura idoneam ad usum facit in reactionibus ubi concentrationes altos DTT reactioni adversas est (exempli gratia Real-time RT-PCR).
Aapplication
Productum hoc in quolibet experimento late adhiberi potest ubi impedimentum RNase potest ad degradationem RNA declinandam, ut:
1. Synthesis RT-PCR, RT-qPCR, etc.;
2.Protect RNA degradationis in vitro transcriptione/translatione (eg replicatio viralis in vitro);
3.Inhibitio RNAse actionis in RNA solitudo et purificatio.
Repono Conditions
Copia apud -25～-15℃;
Cyclus congelo-thath ≤ 5 times;
Valet pro 1 annis.
Unitas definition
Una unitas definitur quantum Rnase Inhibitoris requiritur ad prohibendum activitatem 5 ng of Rnase A per 50%.
M. pondus
RNase Inhibitor (Glycerol-free) est dapibus 50 kDa.
Regimen quālitātis
Exonuclease Actio:
Incubatio 40 U enzyme cum 1 μg λ-Hind III digestum DNA pro 16 horis ante 37°C consecutum est in nullo detectabili dejectione DNA secundum electronicam electrophoresis determinatam.
Actio Endonuclease:
Incubatio 40 U enzyme cum 1 μg λ DNA per 16 horas ante 37°C in nullo detectabili dejectione DNA secundum electronicas electrophoresis determinata est.
Nicking Actio:
Incubatio 40 U enzyme cum 1 μg pBR322 pro 16 horis ante 37℃ consecuta est nullo detectabili degradatione DNA secundum electronicas electrophoresis determinatae.
RNase Actio:
Incubatio 40 U enzyme cum 1.6 μg MS2 RNA per 4 horas ad 37℃ consecuta est nullo detectabili deformitate RNA iuxta electronicas electrophoresis determinatae.
E.coli DNA:
40 U Enzyme deprehenditur TaqMan qPCR.E.coli DNA est ≤ 0. 1pg/40U.
Notes
1.Don't agite vel ne enzyme inactivation violenter concitare.
2.RNase inhibitor est activus temperaturis ab 25℃ ad 55℃ et inactivated ≥65℃.
3. Rnase H, Rnase 1, ac RNase T1 actio non obstat.
4. Distinctio pH ad inhibitionem RNase activitatem lata est (activa ad pH 5-9), exhibens maximam actionem in pH 7-8.
